본 기술은 메르캅토운데칸올 링커로 표면을 개질한 금 전극에 피브리노겐을 고정하고 트롬빈으로 피브린 모노머층을 만든 뒤, 페로센으로 표지된 피브리노겐(Fc-Fib)과 시료를 반응시켜 트롬빈 효소 활성에 따른 응집량을 산화-환원 전류로 측정하는 트롬빈 검출방법입니다.
히루딘 펩타이드를 이용한 면역측정법은 히루딘이 다른 단백질과 이미 결합한 경우 트롬빈과 결합하지 못해 정확한 정량이 어려운 문제가 있었습니다. 압타머를 표면에 고정하는 방법은 압타머 결합으로 단백질 활성이 줄어 효소 반응 기반 검출의 정확도가 떨어지는 한계가 존재했습니다.
본 기술은 여러 알칸티올레이트 가운데 피브리노겐 어셈블리의 양과 배향을 가장 효율적으로 형성하는 메르캅토운데칸올을 링커로 선택하고, 피브린 모노머 위에 Fc-Fib가 결합하도록 하여 트롬빈 활성에 비례하는 전기화학 신호를 얻습니다. 미분펄스 전압전류법으로 측정하며 1 ng/ml에서 1 μg/ml에 이르는 넓은 농도 범위에서 높은 선택성과 특이성을 보입니다. 이 방법은 혈액 응고 이상 진단과 폐전이 종양 마커 검사용 전기화학 바이오센서에 적용될 수 있어 항체나 압타머 없이도 소형·저비용으로 트롬빈을 정밀 정량할 수 있습니다.
본 발명은 교과부의 박테리오파아지를 활용한 전기화학 바이오센서의 개발 지원을 통해 개발되었습니다.
N/A
